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上海莼试生物技术有限公司
联 系 人:
李小姐
企业类型:
经销商
注册日期:
2017-05-09
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T25 COLO 829细胞
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发布时间:2021-04-20 产地:进口、国产
市场价格:面议
新品详情

上市时间:2021-04-20

创 新 点:抗透明带(ZP)抗体检测试剂盒(化学发光法)
抗绒毛膜(HCG)抗体检测试剂盒(化学发光法)
弓形体(Tox)抗体检测试剂盒(化学发光)
巨细胞病毒(CMV)抗体检测试剂盒(化学发光)
单纯疱疹病毒( HSV-I)抗体检测试剂盒(化学发光)
风疹病毒 (RV)抗体检测试剂盒(化学发光)

产品简介

COLO 829细胞公司相关产品:
肺癌相关蛋白Y抗体Slit2/Slil3/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠神经迁移蛋白Slit2/3抗体IgG
心脏和神经嵴衍生蛋白1抗体SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 荧光素标记抗猪水肿素(O139)抗体IgG

产品详细信息

公司产品仅用于科研以下是细胞的订购信息:

英文简称:COLO 829细胞    

产品名称:黑色素瘤细胞

规格:T25

形态特性:成纤维细胞

生长特性:贴壁生长

特征特性:

培养条件:RPMI1640+10%FBS

传代方法: 1:CQ-1:6传代,2-3天换液1次。

货号:CS-X63955
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

图片13.jpg 

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

注意事项:
1)冻存前细胞状态,细胞*在对数生,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
3)消化和吹打,切忌*消化过度,吹打不可太用力,*不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
胡椒枯萎病拉丁属名: Trametes cinnabarina

血朱栓孔菌拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

酿酒酵母拉丁属名: rhuriopathiae

猪丹丝菌拉丁属名: Pseudomonas grimontii

格氏假单胞菌*拉丁属名: Cryptococcus aureus

金黄色隐球酵母注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

灵芝拉丁属名: Paracoccus sulfuroxidans

氧化硫副球菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

松口蘑用途: 用于抗虫因的分离和抗虫相关础研究。

苏云金芽胞杆菌拉丁属名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

交链孢拉丁属名: Aspergillus terreus var. aureus

土曲霉金色变种拉丁属名: Pseudomonas mandelii

孟氏假单胞菌拉丁属名: Rhodococcus phenolicus

酚红球菌拉丁属名: Erwinia tasmaniensis

Erwinia拉丁属名: Lactobacillus plantarum
COLO 829细胞扎鲁司特英文名称: Zearalenone from Giberella zeae磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体包装5g

扎托*英文名称: Zinc carbonate basic蛋白*磷酸酶1C抗体包装25g

周效磺(磺多辛)英文名称: Zinc distearate磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗体包装5g

左羟哌英文名称: Zinc hydroxide磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗体包装1g

*英文名称: Zinc iodide磷脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体包装25g

*英文名称: Zinc phosphate tetrahydrate磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体包装5g

*英文名称: Zinc sulfide磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体包装1g

(R)-9-[2-(二乙基磷酰氧基)基]腺嘌呤英文名称: Zirconium (IV) oxide磷酸化蛋白激酶C theta抗体包装5g

5'-O-(4,4'-二氧基三苯基)-N6-苯酰...英文名称: Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate磷脂酰肌激酶p85β抗体包装1g

*B英文名称: Zirconium hydroxide hydrate磷酸化磷脂酰肌激酶p85β抗体包装100g

(+)-5-反式前列英文名称: α-(Trichloromethyl)benzyl acetate磷酸化蛋白磷酸酶2C亚型α抗体包装25g

(+)-α-酚醋酸盐英文名称: Trimethylacetic acid三磷酸腺苷受体受体P2X2抗体包装5g

(+)-前列英文名称: Transfection Reagents-Biofection磷酸化桩蛋白Paxillin抗体包装1g

(+/-)-4'-羟基硫酸心得安英文名称: trans-Cinnamaldehyde多型性腺瘤基因1蛋白抗体包装5g

(+/-)-4-羟基盐酸心得安英文名称: Fullerene C60 (pure)扑克蒙蛋白抗体包装100g
实验报告
一、产分离与培养:
   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将*成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% *和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
   1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 


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